適用范圍：本方法適用于蘇丹紅（I、II、III、IV號）的現(xiàn)場快速檢測。

樣品處理：

1.取約1g樣品于試管中，加入2～5ml乙酸乙酯，振搖提取1分鐘，靜置5分鐘，做為樣品溶液。

2.取一張層析板，在硅膠面底端向上1cm處、平行相隔1cm、用鉛筆畫出將要點樣的五個+字線或點五個小點。

3.用四支毛細管分別沾取蘇丹紅I、II、III、IV號對照液少許（毛細管尖端不多于0.5cm容積距離），點在層析板I、II、III、IV號+字線上，另取1支毛細管沾取樣品溶液（體積不限），將其點在層析板5號+字線上（溶液的顏色較淺時，可在每次點樣斑點揮干后重復(fù)點樣），斑點直徑控制在5mm以內(nèi)。

測定：

取一個約250ml的燒杯，加入約5ml展開劑，將層析板（樣品端朝下）豎直放入展開劑中并靠在杯壁上，待展開劑沿層析板向上平行展開至約4～5cm處時取出層析板，觀察結(jié)果。

判斷：

在本實驗條件下，如果樣品在展開軌跡中出現(xiàn)斑點，其斑點展開（向上跑）與某一對照液展開后的距離與斑點形狀相同、顏色雖淺卻相近時，可懷疑樣品中可能加了這一色素或其它非食用色素。為了進一步確定，可做加標試驗，若加標試驗也確定是該色素，基本可判斷是陽性樣品。若樣品斑點不展開或展開后高度不同，顏色完成不同，則樣品中不含有這一色素。

加標試驗方法：

加標試驗是對測定中出現(xiàn)了懷疑是有加有某一種蘇丹紅樣品的進一步確定。

取一張層析板，在硅膠面底端向上1cm處、平行相隔1cm的兩點，均點上懷疑的樣品。其中一點上再點上檢測中出現(xiàn)相同斑點的這一蘇丹紅。再展開，展開方法同測定方法。加標展開后，樣品點與加有標樣的點展開高度一樣，斑點形狀相同、顏色雖淺卻相近時，基本可懷疑樣品中可能加了這一色素；如果加標展開后，出現(xiàn)以下幾種情況，可能不是該色素。

1、樣品點與加有標樣的點展開高度不一樣.

2、加有標樣的點展開后出現(xiàn)兩個斑點或色環(huán)。

3、樣品點與加有標樣的點展開高度相同，但加有標樣的點展開后能分辨出有兩個斑點或色環(huán)。

4、樣品點與加有標樣的點展開高度相同，但顏色完全不同。

試劑盒組成：

層析板                       50塊，

展開劑                        2瓶，

毛細管                        2管，

蘇丹紅I、II、III、IV號對照液      各1瓶，

10ml比色管                    1支，

大吸管                      10支。

注意事項：

1.本方法用于快速篩選樣品中是否加入了蘇丹紅（I、II、III、IV號）。精確測定需要采用高效液相色譜儀。

2.蘇丹紅對照液的點樣量不要太多，否則會產(chǎn)生斑點拖尾現(xiàn)象。在用毛細管沾取對照液后，可在棉花球上或一張廢棄的層析板上沾棄多余的溶液，使毛細管尖端留有不多于0.5cm距離的溶液，將其一次性點到層析板+字線上。

3.展開劑的使用應(yīng)適量，液面高度應(yīng)控制在斑點下，展開過程中層析板不能傾倒，每展一張層析板最好更換一次展開劑。

4.  環(huán)境溫度會影響斑點的展開距離。溫度高時，展開劑揮發(fā)得較快，致使斑點的展開距離較短，展開時應(yīng)在燒杯上加蓋一個表面皿或玻璃板；溫度低時，可敞蓋展開。

5.檢測的樣品數(shù)量較多時，不必每張層析板上都點對照液，其中一張點對照樣，其它板可全部點樣品即可。

6.當展開過程中出現(xiàn)斑點，并與某一標準品展開相同時，為了準確判斷是否添加了該號蘇丹紅，應(yīng)再加標試驗。準確測定需要采用高效液相色譜儀。

7.蘇丹紅I、II、III、IV號對照液出現(xiàn)揮干后，可加入1ml左右乙酸乙酯完全溶解后再使用。

8.自備試材：200ml燒杯，乙酸乙酯（分析純）和鉛筆。

9.大吸管是帶刻度的吸管，用它量取樣品

10.每次用完后立即清洗干凈試管、吸管等以備下次再用

11.試液有效期為12個月.